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【簡(jiǎn)答題】插入失活和插入表達(dá)法篩選重組體的主要差別是什么?
答案:
主要差別是:插入失活法是直接根據(jù)失活基因的表型變化來(lái)篩選重組體;插入表達(dá)是根據(jù)一個(gè)基因的失活引起另一個(gè)基因的表達(dá)表型來(lái)選...
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【簡(jiǎn)答題】切口移位(nick translation)標(biāo)記探針的主要步驟有哪些?
答案:
(1)DNaseI造成切口;
(2)DNA聚合酶Ⅲ的 5’3’外切核酸酶進(jìn)行切割;
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【簡(jiǎn)答題】你在做Southern 印跡分析,并且剛完成了凝膠電泳這一步。根據(jù)方案,下面一步驟是用 NaOH溶液浸泡凝膠,使 DNA變性為單鏈。為了節(jié)省時(shí)間,你略過(guò)了這一步,直接將DNA從凝膠轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜上。然后用標(biāo)記探針雜交,最后發(fā)現(xiàn)放射自顯影片是空白。錯(cuò)在哪里?
答案:
如果你的雜交探針是雙鏈的,可能因?yàn)樵诩尤腚s交混合物之前忘記將探針變性而得到空白的放射自顯影結(jié)果。
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