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問答題

【簡(jiǎn)答題】一個(gè)攜帶有氨芐和卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒被僅在卡那霉素基因中有識(shí)別位點(diǎn)的EcoRI消化。消化物與酵母 DNA 連接后轉(zhuǎn)化對(duì)兩種抗生素都敏感的 E.coli 菌株。（1）利用哪一種抗生素抗性選擇接受了質(zhì)粒的細(xì)胞？（2）怎樣區(qū)分接受了插入酵母 DNA的質(zhì)粒的克??？

答案：

（1）選擇Amp^r的轉(zhuǎn)化子；
（2）所需的克隆是Amp^r和Kan^r。任何能夠抗這兩種藥物的克隆都是自連的非重組質(zhì)粒。

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答案：（1）DNaseI造成切口；
（2）DNA聚合酶Ⅲ的 5’3’外切核酸酶進(jìn)行切割；